FITC-PEI 异硫氰酸荧光素标记聚乙烯亚胺
产品名称:FITC-PEI 异硫氰酸荧光素标记聚乙烯亚胺
产品描述:
FITC-PEI 异硫氰酸荧光素标记聚乙烯亚胺
一、产品概述
FITC-PEI 是一种通过异硫氰酸荧光素 Fluorescein Isothiocyanate,FITC 对聚乙烯亚胺 Polyethylenimine,PEI 进行共价标记获得的阳离子聚合物荧光探针。该产品在保留PEI高密度正电荷、强核酸结合能力及基因转染性能的基础上,引入高灵敏绿色荧光信号,使其能够用于基因递送过程追踪、细胞摄取研究、纳米载体分布成像及转染机制分析。
聚乙烯亚胺是一种含有大量伯胺、仲胺及叔胺基团的阳离子聚合物,具有强的质子化能力与DNA/RNA结合能力,被广泛应用于非病毒基因递送系统。然而PEI在细胞内的行为 如摄取、内吞逃逸、核定位等 需要荧光标记手段进行可视化研究,FITC-PEI因此成为经典工具分子之一。
二、结构与标记原理
1. FITC荧光基团
FITC是一种常用绿色荧光染料,激发波长约495 nm,发射波长约519 nm,具有高亮度、高灵敏度及良好检测兼容性,适用于荧光显微镜、流式细胞术及活细胞成像。
2. PEI结构特点
PEI分为线性PEI与支化PEI两种结构,其中支化PEI bPEI 因含有大量可质子化氨基而被广泛用于基因递送。其强阳离子特性可与带负电荷的核酸形成稳定复合物 polyplex 。
3. 标记反应机制
FITC通过其异硫氰酸基团 –N=C=S 与PEI中的伯胺基发生亲核加成反应,形成稳定硫脲键,从而实现共价荧光标记。
该反应通常在pH 8.0–9.0弱碱性条件下进行,以提高反应效率并减少PEI结构破坏。
三、产品特性
1. 高荧光可视化能力
FITC提供稳定绿色荧光信号,可用于实时追踪PEI在细胞中的分布与转运过程。
2. 保持高转染活性
在优化标记比例下,PEI仍保留其与DNA/RNA结合及转染能力。
3. 强阳离子特性
PEI的高电荷密度在标记后依然存在,可与细胞膜及核酸形成稳定复合物。
4. 高细胞摄取效率
FITC-PEI可通过静电吸附快速进入细胞,并主要通过内吞途径进入胞内。
5. 可调标记密度
可通过控制FITC/PEI摩尔比调节荧光强度与生物活性之间的平衡。
四、作用机制
FITC-PEI在生物体系中的行为主要包括以下过程:
PEI与DNA/RNA通过静电作用形成纳米复合物 polyplex
复合物与细胞膜结合并发生内吞进入细胞
在内体酸性环境中,PEI通过“质子海绵效应”促进内体破裂
核酸释放进入细胞质或细胞核
FITC信号用于追踪PEI及其复合物的细胞内路径
该机制使FITC-PEI成为研究非病毒基因递送机制的重要工具。
五、应用领域
1. 基因递送与转染研究
用于评估PEI介导DNA/RNA递送效率及转染机制分析。
2. 细胞摄取与内吞研究
用于观察PEI及其复合物的细胞进入路径及动力学行为。
3. 纳米基因载体构建
用于构建可视化阳离子纳米载体体系。
4. 内体逃逸机制研究
用于研究PEI“质子海绵效应”及内体破裂过程。
5. 荧光成像与流式分析
适用于共聚焦显微镜、活细胞成像及流式细胞术定量分析。
6. 药物递送系统评价
用于阳离子聚合物载体在体外及体内分布行为研究。
六、使用方法 参考
将FITC-PEI溶解于无菌水或PBS中 pH 7.2–7.4 。
根据实验需求稀释至0.1–100 μg/mL。
与DNA/RNA或细胞体系混合形成复合物或直接孵育。
37℃培养30 min–4 h。
PBS洗涤后进行荧光显微镜或流式检测。
具体条件需根据PEI分子量及细胞类型优化
七、保存条件与稳定性
保存温度:-20℃避光保存
避免反复冻融
建议分装保存
避免强光照射导致FITC淬灭
水溶液中稳定性有限,建议现配现用
八、注意事项
FITC对光敏感,应避光操作。
PEI具有一定细胞毒性,高浓度可能影响细胞活性。
标记过高可能降低PEI转染效率。
应避免在高盐或端pH条件下使用。
建议设置未标记PEI及FITC对照实验。
九、产品优势总结
FITC-PEI结合了聚乙烯亚胺强大的核酸结合与转染能力以及FITC高灵敏荧光成像能力,实现了非病毒基因递送过程的可视化研究。其在基因**研究、纳米载体及细胞转染机制分析中具有重要应用价值,是研究阳离子聚合物递送系统的经典荧光工具之一。
西安齐岳生物科技有限公司专注于科研级荧光标记材料及功能化生物材料的研发与供应,可提供多种荧光染料及标记产品,包括FITC、Cy3、Cy5、Cy5.5、Cy7、罗丹明、吲哚菁绿(ICG)、Ce6等系列荧光探针,并支持多糖、PEG、脂质、蛋白、多肽及纳米材料的荧光标记与定制服务。其荧光标记材料具有发光性能稳定、灵敏度高、生物相容性良好等特点,广泛应用于细胞示踪、活体成像、药物递送、分子识别、生物检测及纳米医学等研究领域。公司可根据客户实验需求提供不同分子量、不同修饰基团及多种荧光波长的产品方案,为生命科学和生物医药研究提供可靠的材料支持。
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