FITC-PLL 异硫氰酸荧光素标记聚赖氨酸
产品名称:FITC-PLL 异硫氰酸荧光素标记聚赖氨酸
产品描述:
FITC-PLL 异硫氰酸荧光素标记聚赖氨酸
一、产品概述
FITC-PLL 是一种通过异硫氰酸荧光素 Fluorescein Isothiocyanate,FITC 对聚赖氨酸 Poly-L-lysine,PLL 进行共价荧光标记制备而成的阳离子高分子荧光探针。该产品在保留PLL高密度正电荷、生物黏附性及细胞结合能力的基础上,引入高灵敏绿色荧光信号,使其能够用于细胞膜吸附、基因递送体系追踪、纳米材料表面修饰及生物界面相互作用研究。
聚赖氨酸是一种由赖氨酸单体聚合形成的多肽高分子,具有大量伯胺基团 –NH₂ ,在生理条件下带正电荷,能够与带负电荷的细胞膜、DNA/RNA以及多糖分子发生强烈静电相互作用,因此被广泛用于基因转染载体、细胞黏附促进材料及生物界面修饰。
二、标记原理与结构特点
1. FITC荧光基团
FITC 激发波长约495 nm,发射波长约519 nm 是一种经典绿色荧光染料,具有高量子产率、易检测及良好光稳定性,广泛应用于生物成像与标记体系。
2. 聚赖氨酸结构特性
PLL分子主链由赖氨酸残基组成,每个重复单元均含有ε-氨基,使其成为天然高密度阳离子聚合物,具有的细胞吸附能力。
3. 标记反应机制
FITC通过其异硫氰酸基团 –N=C=S 与PLL中的伯胺基发生亲核加成反应,形成稳定的硫脲键,实现共价偶联。
该反应通常在弱碱性条件 pH 8.0–9.0 下进行,以提高标记效率并避免PLL结构降解。
三、产品特性
1. 高荧光可视化能力
FITC提供明亮稳定的绿色荧光信号,适用于荧光显微镜、共聚焦成像及流式细胞分析。
2. 强阳离子特性保留
PLL本身的高正电荷密度在标记后仍然保留,可继续与细胞膜及核酸分子发生静电结合。
3. 良好的生物黏附性
FITC-PLL可高效吸附于细胞表面,提高细胞固定效率及界面结合稳定性。
4. 可调标记密度
FITC修饰比例可调节,从而在荧光强度与生物活性之间取得平衡。
5. 水溶性良好
产品可溶于PBS及水溶液体系,适用于多种体外生物实验。
四、作用机制
FITC-PLL在生物体系中的行为主要基于其阳离子特性与荧光标记特性协同作用:
PLL通过静电作用吸附在细胞膜表面 负电荷磷脂双层
形成稳定的细胞表面包覆层或纳米界面层
在基因递送体系中与DNA/RNA形成复合物 polyplex
FITC信号用于实时追踪其结合、内吞及分布过程
进入细胞后可通过内吞途径进入内体/溶酶体系统
该机制使其成为研究细胞界面相互作用及基因递送行为的重要工具。
五、应用领域
1. 细胞标记与荧光成像
用于细胞膜表面标记、细胞黏附行为观察及活细胞成像分析。
2. 基因递送系统研究
作为阳离子载体模型,用于DNA/RNA复合物构建及转染效率评估。
3. 纳米材料表面修饰
用于纳米颗粒、脂质体及聚合物材料表面正电荷功能化。
4. 生物界面相互作用研究
用于分析细胞与材料之间的静电吸附、黏附及界面行为。
5. 药物递送与载体追踪
用于阳离子载体在体外及体内分布行为的荧光示踪。
6. 流式细胞术分析
用于定量分析细胞摄取、结合及转染效率。
六、使用方法 参考
将FITC-PLL溶解于PBS或无菌水中 pH 7.2–7.4 。
按实验需求稀释至0.1–50 μg/mL范围。
加入细胞培养体系或材料体系中孵育。
37℃条件下反应或培养30 min–2 h。
PBS洗涤后进行荧光显微镜或流式检测分析。
具体条件需根据细胞类型与实验目的优化
七、保存条件与稳定性
保存温度:-20℃避光保存
避免反复冻融
建议分装保存
防止强光照射导致FITC淬灭
水溶液中长期保存稳定性有限,建议现配现用
八、注意事项
FITC对光敏感,操作需避光进行。
PLL具有较强阳离子毒性,高浓度可能影响细胞活性。
避免在高盐或端pH条件下使用,以免影响聚合物构象。
标记密度过高可能降低PLL与DNA结合能力。
建议设置未标记PLL及FITC对照组。
九、产品优势总结
FITC-PLL将聚赖氨酸的高效阳离子结合能力与FITC的高灵敏荧光检测能力相结合,实现了对细胞界面相互作用、基因递送过程及纳米材料行为的可视化追踪。其具有操作简便、信号稳定、适用范围广等特点,是细胞生物学、材料科学及基因工程研究中常用的重要荧光工具分子。
西安齐岳生物科技有限公司专注于科研级荧光标记材料及功能化生物材料的研发与供应,可提供多种荧光染料及标记产品,包括FITC、Cy3、Cy5、Cy5.5、Cy7、罗丹明、吲哚菁绿(ICG)、Ce6等系列荧光探针,并支持多糖、PEG、脂质、蛋白、多肽及纳米材料的荧光标记与定制服务。其荧光标记材料具有发光性能稳定、灵敏度高、生物相容性良好等特点,广泛应用于细胞示踪、活体成像、药物递送、分子识别、生物检测及纳米医学等研究领域。公司可根据客户实验需求提供不同分子量、不同修饰基团及多种荧光波长的产品方案,为生命科学和生物医药研究提供可靠的材料支持。
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