扁豆凝集素的性质研究

产品名称：扁豆凝集素的性质研究

产品描述：

扁豆凝集素的性质研究  

3.1 试验材料：

扁豆凝集素提取液，考马斯亮蓝，高碘酸-Schiff 试剂，生理盐水，PBS缓冲液，2 ％兔血细胞悬液，缓冲系统，金属离子，乳糖，蔗糖，麦芽糖，a-半乳糖，D-果塘和葡萄糖的蒸馏水溶液，大肠杆菌，产气杆菌等PDA培养平板

3.2 试验方法：

3.2.1 扁豆凝集素的基本性质检测 

3.2.1.1 纯度鉴定和糖蛋白的确定  采用柱状圆盘聚丙烯酰胺凝胶电泳，用考马斯亮蓝和高碘酸-Schiff 试剂分别染色，根据凝胶呈现色带的情况确定扁豆凝集素的纯度和是否是糖蛋白。  

3.2.1.2 扁豆凝集素的等电点测定  采用聚丙烯酰胺凝胶电聚焦发测定其等电点，所用凝胶浓度为7%，两性电解质为ph3.0-10.0的Ampholin，其较后浓度为1.5%左右，上下电极分别是5%的磷酸而后5%的乙二胺溶液。

3.2.1.3 分子量的测定  采用Bio-Gelp 100凝胶色层法，以牛血清蛋白（68000）、卵清蛋白（45000）、胃蛋白酶或乳球蛋白（35000）、和糜蛋白酶原（24500）等为标准蛋白，用1 molNaCl溶液作为平衡也和洗脱液，在ø1.2×100cm玻璃柱内进行。[6]  3.2.1.4 扁豆凝集素的活力测定  取96孔微型凝血板，在每一个孔内滴入25μl0.9％生理盐水。取25μl硫酸铵沉淀样品，进行系列倍比稀释(从前一孔吸取25μl液体，放入下一孔内，充分混合后25μl液体放入下一孔内，如此操作至倒数第二个孔)，留下每一排的较后一孔，作为对照。在每一个孔内滴入25 u1 2％兔血红细胞，室温下放置30 min后观察。

3.2.2 扁豆凝集素的热稳定性测定  在96孔V型血凝板上加4 5μl凝集素溶液与等量PBS缓冲液倍比稀释后,放在温度为30℃、40℃、 50℃、60℃、 70℃、 80 ℃、 90 ℃水浴中保温5min后取出，待其冷却至室温，加入等量的 2 ％兔血细胞悬液，振匀。1h 后，用显微镜进行检测。血凝活力以凝集素较大稀释倍数(以2 n表示)，以PBS作空白对照。比较凝集活性。

纯度：99%

供应商：西安齐岳生物科技有限公司

产地：西安

用途：科研

包装：mg和G级

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