扁豆凝集素的分离纯化

产品名称：扁豆凝集素的分离纯化

产品描述：

扁豆凝集素的分离纯化  

试验材料  

扁豆种子，无水乙醚，0.15 mol/L NaCl,0.02 mol/L Tris-HCl,硫酸铵，聚乙二醇， DEAE-52， Sephacryl S-300、CMFastFlow、SephadexG-25，丙烯酰胺，亚甲基双丙烯酰胺，链霉蛋白酶(pronase E)，牛血清白蛋白(BSA)，对二甲基氨基苯甲醛(DAB)、N-溴代丁二酰亚胺(NBS)。

扁豆凝集素粗品的制备：

取扁豆种子100g，去皮磨成粉末，用无水乙醚(1：4，v:v)于4℃浸泡脱脂2次。然后，用含0.15 mol/L NaCl的0.02 mol/L Tris-HCI，pH 7.8缓冲液(1：4，v:v)在4℃下浸提两次每次24小时。 提取液经离心(4℃，10000rpm，30 min)后，弃去沉淀，上清液采用硫酸铵分段盐折法，取饱和度为40％～80％的沉淀，将沉淀溶于0.02mol/L Tris-HCl，pH 7．8缓冲液中得到相应的粗品。

2.扁豆凝集素的纯化  粗品4℃下充分透析除盐，然后上经0.02mol/L Tris-HCI,pH 7.8缓冲液平衡的DEAE-52阴离子交换柱，充分淋洗后，换用含0.5mol/LNacl的相同缓冲液进行离子线性梯度洗脱，分部收集，流速0.5 ml/min，3 ml/管，经紫外和凝集兔红细胞活性检测后，收集活性部分。此活性部分对0.02 mol/L NaAc-HAc,pH 5.0缓冲液充分透析，然后上用相同缓冲液平衡的CM Fast Flow阳离子交换柱，充分淋洗后，换用含0.5 mol/LNaCl的相同缓冲液进行离子线性梯度洗脱，分部收集，流速0.5 ml/min，3 ml/管，经紫外和凝集兔红细胞活性检测后，收集活性部分。此活性部分用聚乙二醇20 000浓缩后，对含0．15 mol/L NaCl的0．02mol/L Tris-HCl，pH 7.8缓冲液充分透析，并用相同缓冲液平衡Sephacryl S-300柱，然后在FPLC上进行分子筛层析纯化，分部收集，流速为l ml/min，3 ml/管，经紫外和凝集兔红细胞活性检测后,收集活性部分,再过Sephadex G-25柱除盐后得扁豆凝集素纯品。

纯度：99%

供应商：西安齐岳生物科技有限公司

产地：西安

用途：科研

包装：mg和G级

西安齐岳生物供应一系列的凝集素；同时提供各种荧光标记修饰偶联的凝集素。提供罗丹明、CY3、CY5、FITC、生物素Biotin、琼脂糖Agarose、DyLight 488、DyLight 594、DyLight 649、Texas Red标记各种凝集素。

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