RB-Cytochrome C 罗丹明标记细胞色素C RB标记细胞色素C
产品名称:RB-Cytochrome C 罗丹明标记细胞色素C RB标记细胞色素C
产品描述:
RB-Cytochrome C 罗丹明标记细胞色素C RB标记细胞色素C
产品概述
RB-Cytochrome C 是一种将红色荧光染料 罗丹明 B(Rhodamine B, RB) 共价标记于细胞色素 C 分子上的高性能生物试剂。细胞色素 C 是线粒体内的重要小分子血红素蛋白,在电子传递链中负责电子传递,同时在凋亡信号传导中起关键作用。通过罗丹明 B 的标记,细胞色素 C 不仅保留其天然功能,还具备了红色荧光可视化特性,为蛋白质定位、凋亡机制研究以及细胞内动态追踪提供了直观工具。
RB-Cytochrome C 在 540–550 nm 激发光下可发射约 565–580 nm 的红色荧光,适合在荧光显微镜、共聚焦显微镜或流式细胞仪中检测,便于研究线粒体功能、蛋白质内化及药物作用机制。
化学结构与标记原理
RB-Cytochrome C 的标记原理是通过罗丹明 B 的活性基团(如异硫氰酸酯或羧基活化形式)与细胞色素 C 分子上的赖氨酸 ε-氨基或 N 端氨基形成稳定共价键。该结合方式确保标记牢固,同时尽量保留蛋白的天然折叠和生物活性。
主要化学特性包括:
分子量略高于天然细胞色素 C,取决于标记的 RB 分子数;
良好的水溶性,可溶于 PBS、Tris 等中性缓冲液;
荧光性质稳定,可在中性环境下长期保存和使用;
生物学活性保持良好,可参与电子传递及凋亡相关实验。
产品规格
常规规格如下:
浓度范围:0.1–1 mg/mL,实验中可根据需求稀释;
储存条件:-20℃ 冻存避光,短期可 4℃ 保存;
缓冲体系:一般使用 PBS 或 Tris 缓冲液,可加入少量 BSA 或甘油稳定蛋白;
包装形式:冻干粉或冻存液体,便于实验使用。
功能特点
红色荧光可视化:罗丹明 B 信号强,便于低浓度检测与空间定位;
生物活性保留:标记后仍可维持细胞色素 C 的电子传递和凋亡功能;
高灵敏度:红色荧光在生物样品中背景低,便于确定量和成像;
多实验兼容性:可与绿色、蓝色或近红外荧光标记的分子组合,实现多色共定位实验;
操作简便:标记稳定、*光漂白能力良好,可直接用于多种实验条件。
主要应用方向
1. 细胞凋亡研究
RB-Cytochrome C 可用于追踪线粒体向细胞质释放的过程,研究凋亡启动和执行机制。通过荧光显微镜观察红色荧光信号从线粒体扩散到胞质,可实时评估凋亡水平及药物对凋亡通路的影响。
2. 线粒体功能与蛋白内化研究
可用于分析蛋白质在细胞内的摄取、分布及线粒体膜通透性,为线粒体相关疾病、氧化应激及细胞信号研究提供可靠手段。
3. 荧光成像与共聚焦显微镜应用
RB-Cytochrome C 可在共聚焦显微镜下进行高分辨率成像,用于蛋白分布、亚细胞结构定位及药物作用机制分析。
4. 荧光免疫学与蛋白质相互作用分析
可作为红色荧光探针参与免疫标记和蛋白-蛋白相互作用实验,实现多色荧光共定位和分子动力学分析。
5. 药物筛选与蛋白动力学研究
在药物筛选实验中,可通过红色荧光变化监测蛋白质活性和药物作用效果,为高通量筛选和药物开发提供直观数据。
使用注意事项
光敏性:罗丹明 B 对光敏感,操作及存储需避光;
缓冲条件:建议在中性缓冲液中使用(pH 7–8),端酸碱环境可能影响蛋白活性和荧光信号;
冻融循环:避免多次冻融,可分装冻存以保证活性和荧光强度;
浓度控制:实验中应合理稀释,避免荧光淬灭或过量蛋白引起非特异性作用;
安全防护:作为蛋白标记试剂,应佩戴手套、护目镜,严格遵守生物实验室安全规范。
小结
RB-Cytochrome C 是一种兼具 生物活性与红色荧光可视化功能 的高性能生物试剂,适用于细胞凋亡研究、线粒体功能分析、蛋白内化及分布追踪、共定位实验以及药物筛选等多种应用。其红色荧光信号稳定、操作便捷、*光漂白能力强,使其成为现代细胞生物学、分子生物学及药物研发研究中不可或缺的工具。通过合理设计实验条件,RB-Cytochrome C 能够提供可靠的荧光数据和定量信息,为科研人员在蛋白质定位、功能解析及信号通路研究中提供直观、科学的实验支持。
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