FITC-PNA 荧光素标记花生凝集素 FITC-Peanut Agglutinin
产品名称:FITC-PNA 荧光素标记花生凝集素 FITC-Peanut Agglutinin
产品描述:
FITC-PNA 荧光素标记花生凝集素 FITC-Peanut Agglutinin
一、产品简介
FITC-PNA是一种荧光标记的植物凝集素,来源于花生(Arachis hypogaea)种子。PNA是一种特异性结合糖类的蛋白,主要识别并结合半乳糖(Galβ1-3GalNAc)残基,尤其对未被唾液酸修饰的糖链具有高度亲和力。通过荧光素异硫氰酸酯(FITC)对PNA的共价标记,获得了兼具糖结合特异性和绿色荧光信号的标记蛋白。
FITC-PNA广泛应用于细胞和组织的糖链结构研究,尤其是在细胞表面糖基化分析、组织学诊断、免疫组织化学染色和流式细胞术等领域,成为研究糖链表达与功能的重要工具。
二、结构与分子特性
PNA是一个由两个相同亚单位组成的二聚体,每个亚单位分子量约为27 kDa,整体约54 kDa。其糖结合部位位于分子表面,能够特异性识别Galβ1-3GalNAc结构,且结合需依赖钙离子。PNA的结合特点使其成为检测O-连接糖蛋白核心1结构(T*原)的理想探针。
FITC分子通过异硫氰酸基与PNA蛋白表面的赖氨酸氨基发生共价结合,形成稳定的荧光标记,标记过程中控制FITC与PNA的比例,既保证荧光强度,又保持糖结合活性。
三、产品规格与技术参数
参数 说明
标记染料 荧光素异硫氰酸酯(FITC)
载体蛋白 花生四烯酸凝集素(Peanut Agglutinin)
分子量 约54 kDa(双亚单位二聚体)
荧光激发波长 490 nm
荧光发射波长 520 nm
纯度 ≥ 95%
产品规格 1 mg、5 mg、10 mg等多种规格
溶解性 PBS缓冲液、纯化水良好溶解
储存条件 -20℃避光保存
标记度 3-7个FITC分子/每个PNA分子
四、主要应用领域
糖链结构分析
FITC-PNA能够特异性结合细胞和组织中的Galβ1-3GalNAc糖基结构,常用于细胞表面及细胞外基质中糖蛋白的糖基化分析,是研究细胞糖基化状态及其变化的有力工具。
免疫组织化学与组织切片染色
通过荧光标记,FITC-PNA可对组织切片中糖类的分布进行定位,广泛用于标志物检测、发育生物学及病理学研究。
诊断及标志物研究
PNA对未唾液酸化的O-连接糖蛋白(T*原)的高亲和力使其成为细胞糖链异常表达的检测利器,有助于癌症早期诊断及分型。
流式细胞术与细胞分选
FITC-PNA用于流式细胞仪分析特定细胞群体的糖基化表达,辅助细胞分选及功能研究。
受体结合与细胞信号研究
通过检测糖链的变化,FITC-PNA帮助揭示糖基化在细胞识别、信号传导和免疫调节中的作用。
五、使用方法简述
1. 溶解与储备
将FITC-PNA用PBS缓冲液(pH 7.4)或纯化水轻柔溶解,常制备成1 mg/mL储备液,避免剧烈振荡以保护蛋白活性。
2. 细胞及组织染色
细胞染色:将细胞悬浮于含FITC-PNA的缓冲液中,浓度一般为5-50 µg/mL,在室温或37℃孵育30分钟至1小时。孵育后用PBS洗涤以去除未结合的探针。
组织切片染色:组织切片浸泡于FITC-PNA溶液中孵育,结合后洗涤,使用荧光显微镜观察。
3. 流式细胞术
将细胞与FITC-PNA混合孵育后,进行流式细胞分析,检测细胞表面糖基表达及细胞群体异质性。
4. 抑制实验
为验证特异性结合,可加入过量的半乳糖或其他特异性糖类竞争性抑制,观察结合信号变化。
5. 荧光检测
使用激发波长约490 nm,发射波长约520 nm的荧光显微镜、共聚焦显微镜或流式细胞仪进行检测和图像采集。
六、储存条件与稳定性
建议在-20℃冰箱避光保存,避免荧光素光漂白。
避免反复冻融,使用时分装保存,确保蛋白活性。
在合适条件下,产品可稳定保存6个月以上。
使用时尽量减少光照和高温环境。
七、安全性及注意事项
本产品仅限科研用途,禁止临床及诊断应用。
实验过程中需佩戴手套、护目镜及实验服,防止直接接触。
废弃物应按照实验室规范妥善处理。
避免剧烈振荡和高温,保持蛋白结构和荧光性能。
使用时避免长时间光照,防止荧光素光漂白。
八、技术支持与服务
我们提供完善的技术支持:
标记度检测及优化指导。
实验设计与染色方案咨询。
数据分析与结果解读。
定制化规格和标记度服务。
如有任何疑问或个性化需求,欢迎联系技术团队。
九、总结
FITC-PNA结合了花生四烯酸凝集素特异识别糖链的能力和FITC优异的荧光性能,是研究细胞表面糖基化、糖生物标志物及细胞糖类相互作用的重要工具。通过高质量标记和严格纯化,FITC-PNA能够为科研工作提供高灵敏度和高特异性的检测手段,广泛适用于细胞生物学、学及免疫学领域。
选择优质FITC-PNA助力科研人员深入揭示糖链调控机制,推动生命科学研究及疾病诊断技术的发展。
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