制备辣根过氧化物酶(HRP)半抗原标记物的简单介绍
文章来源 : 齐岳生物
作者:zhn
发布时间 : 2022-09-02 19:07:20
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产品名称:制备辣根过氧化物酶(HRP)半抗原标记物的简单介绍
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制备辣根过氧化物酶(HRP)半抗原标记物的简单介绍 西安齐岳生物提供辣根过氧化物酶(HRP)标记前列腺素E2、前列腺素A2、氯磺隆、、、雌二醇、睾酮、孕酮、生育酚、B6、A、胆钙化醇、麦角钙化甾醇、、黄素单核苷酸、核黄素、、新二氢查尔酮、重楼皂苷、松香酸、香草酸、汉、、辣椒素、、芦丁、等小分子科研。 过氧化物酶HRP是什么? 过氧化物酶(Horseradish Peroxidase,HRP),通常来源于辣根(因此称辣根过氧化物酶),是临床检验试剂中的常用酶。该产品不但用于多个生化检测项目,也运用于类(ELISA)试剂盒。HRP分布于植物界,它是由无色的酶蛋白和棕色的铁卟啉结合而成的糖蛋白,糖含量18%。HRP由多个同功酶组成,分子量为40,000,等电点为pH3~9 ,酶催化的适PH因供氢体不同而稍有差异,但多在pH5左右。酶溶于水和58%以下的硫酸铵溶液。用半抗原科研与酶偶联、制备半抗原酶标记物时,通常要求半抗原与酶的克分子比率在10左右。比率过高,会导致复合物中酶含量降低,因而削弱检测信号强度。相反,如果比例过低 ,也会因空间屏蔽作用酶标半抗原与抗体的反应而降低测定的灵敏度。 辣根过氧化物酶标记方法 酶标记抗体的制备方法主要有两种,即戊二醛交联法和过碘酸盐氧化法。 辣根过氧化物酶的标记常用过碘酸盐氧化法,这种方法法只适用于含糖量较高的酶。过碘酸钠将HRP分子表面的多糖氧化为醛基,醛基与抗体分子上的氨基形成Schiff碱而结合。后者可进一步用NaBH (或乙醇胺)还原生成稳定的酶标记抗体。 HRP的NalO4标记法. 原理: HRP为一种糖蛋白(glycoprotein), 其所带的糖基上的糖环能被氧化开环,在2,3-位的一C-C-断开。在适当的氧化条件下,2, 3-位羟基能被氧化为醛基。醛基在碱性条件下可与被标记物的自由氨基(-NH2)形成Shiff碱(-N=CH-), Shiff 碱不稳定,可由逆反应解离。Shiff 碱可由还原剂还原成一CH2一NH一,在HRP与被标记物间形成稳定的共价交联oHRP的NalO4标记法所用氧化剂为NalO4,还原剂采用NaBH4。 为了HRP的过度氧化,在整个标酶的过程中应尽量避光。光照可加快过碘酸钠对HRP糖基的氧化,如在标记过程中不避光,则不可控因素太多。 以下是部分产品列表: 耦合辣根过氧化物酶 Hydrocortisone-Peroxidase Conjugate(Hydrocortisone-HRP) 雌二醇修饰辣根过氧化物酶 Testosterone-Peroxidase Conjugate(Testosterone-HRP) 睾酮-辣根过氧化物酶标记物 Testosterone-Peroxidase Conjugate(Testosterone-HRP) 孕酮-辣根过氧化物酶 Tocopherol-Peroxidase Conjugate(Tocopherol-HRP) 辣根过氧化物酶标记生育酚 Vitamin B6-Peroxidase Conjugate(Vitamin B6-HRP) 辣根过氧化物酶标记B6 Vitamin A-Peroxidase Conjugate(Vitamin A-HRP) A-辣根过氧化物酶标记物 Cholecalciferol -Peroxidase Conjugate(Cholecalciferol-HRP) 辣根过氧化物酶胆钙化醇耦合物 Niacin-Peroxidase Conjugate(Niacin-HRP) -辣根过氧化物酶标记物 Flavin Mononucleotide-Peroxidase Conjugate(FMN-HRP-HRP) 黄素单核苷酸辣根过氧化物酶 Riboflavin-Peroxidase Conjugate(Riboflavin-HRP) 辣根过氧化物酶标记核黄素 Pyrene-Peroxidase Conjugate(Pyrene-HRP) 芘-辣根过氧化物酶标记物 Chrysene-Peroxidase Conjugate(Chrysene-HRP) 屈-辣根过氧化物酶标记物 Fluorene-Peroxidase Conjugate(Fluorene-HRP) 芴-辣根过氧化物酶标记物 Huperzine-Peroxidase Conjugate(Huperzine-HRP) -辣根过氧化物酶标记物 Neohesperidin dihydrochalcone-Peroxidase Conjugate(Neohesperidin dihydrochalcone-HRP) 上一篇: N-羟基磺基琥珀酰亚胺 Sulfo-NHS交联剂 下一篇: 荧光标记生物酶与辅酶(溶菌酶、过氧化联系我们:
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