磁珠法分离纯化不同大小的DNA-片段

文章来源 : 齐岳生物

作者:zhn

发布时间 : 2022-08-23 12:41:44

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产品名称:磁珠法分离纯化不同大小的DNA-片段

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磁珠法分离纯化不同大小的DNA-片段 ?磁珠法是一种固相载体可逆化固定(SPRI)的分离纯化方法,主要原理为:在不同浓度的PEG(polyethylene glycol;聚乙二醇)中,会有不同片段大小的DNA吸附在磁珠的羧基修饰层上,这些DNA可以再溶解在水中,以此来洗脱回收。 实验使用的磁珠分为五层(图1;直径1微米),由内而外依次为:聚苯乙烯材料的、顺磁材料(主要为四氧化三铁)、层聚苯乙烯材料、层顺磁材料以及表面粗糙的羧基修饰层。粗糙的表面更利于核酸与羧基修饰层结合。 ? 图1.磁珠各层成分 ?在整个体系中,PEG的浓度是影响DNA回收的决定性因素(其他因素还包括DNA大小和浓度、盐离子浓度、作用时间等等)。DNA在浓度的PEG存在条件下,NaCl或MgCl2下,使DNA发生脱水反应,分子构象会发生急剧变化,由线状被压缩形成卷曲球状,继而聚集沉淀,同时随PEG分子量、浓度以及盐浓度的不同,不同长度的DNA可以被选择性的沉淀出来。在磁珠体系中,某些分子量(常用的是PEG8000)的PEG的功能主要是与盐离子共同作用,改变不同长度DNA的分子构象,同时增加体系的粘稠程度,使磁珠在其中处于悬浮状态,不易沉降,增加磁珠在空间位置的碰撞与排斥,从而增加核酸与磁珠的聚集效率与,除此之外,PEG与具有相容性,也可样品中的。 ? 图2. 磁珠与DNA结合示意图 当前主流观点认为,处于PEG和盐离子环境中的DNA,因脱水作用而发生分子构象改变后,会暴露出磷酸骨架上大量的带负电荷的磷酸基团,与表面带负电荷的羧基磁珠结合。负负电荷之间的作用是由于带正电荷的盐离子的作用(如Na+;图2)。带负电的磷酸基团借由解离的盐离子(如Na+)与羧基形成离子桥,使DNA被性吸附到羧基磁珠表面。当PEG和盐类被之后,加入水性分子,会充分水化DNA,解除其三者之间的离子相互作用,使得吸附到磁珠的DNA被纯化出来。 操作的具体步骤如下图3(0.6xDNA溶液体积的0.6倍;该倍数要依据各自不同的实验体系自行检测调整): ? 图3.磁珠法分离400-600bp DNA-片断的步骤 如果只是分离纯化单条带PCR产物,我们通常使用1.2x的磁珠,与PCR产物在EP管内混合后放在磁力架上1分钟,丢弃上清,70%酒精洗涤两次后室温干燥,然后将EP管从磁力架上取下,TE或者纯水与磁珠混合,然后放回磁力架取上清,整个过程耗时约15分钟。 磁珠DNA分离法中多次使用了磁力架,来使磁珠聚合并方便除去洗脱液。一般磁力架(针对EP管或者96孔PCR板)约1000-5000人民币,而我们实验室(海洋大学海洋生物多样性与进化研究所-进化基因组学研究室)能够通过3D打印机自行打印并使用了稀土材料制作的高强永磁铁,甚至好于商业化产品。具体制作方法我们会在之后的推送中介绍。 齐岳供应: 硅基磁珠 固相萃取磁珠 PuriMag Si-benzylchloride 苄基氯修饰磁珠 PuriMag Si-benzol 苯基修饰磁珠 PuriMag Si-Cyclohexane 环己基修饰磁珠 PuriMag Si-C18 十八烷基修饰磁珠|Dynabeads? RPC 18等效磁珠|C18磁珠 PuriMag Si-C12 十二烷基修饰磁珠|Dynabeads? RPC 18等效磁珠|疏水磁珠 PuriMag Si-C8 辛基修饰磁珠|疏水磁珠|Dynabeads? RPC protein等效疏水磁珠 PuriMag Si-Cl氯丙基修饰磁珠 PuriMag Si-C3 丙基修饰磁珠|Dynabeads? RPC protein等效疏水磁珠 偶联用磁珠 PuriMag Si-DEAE 单核硅质DEAE弱阴离子交换磁珠 PuriMag Si-SH 巯基修饰磁珠 PuriMag Si-Epoxy 环氧基修饰磁珠|环氧基磁珠|硅包覆环氧基磁珠 PuriMag Si-COOH 羧基修饰磁珠|羧基磁珠|硅羧基磁珠 氨基磁珠|硅包覆氨基磁珠|PuriMag Si-NH2 氨基修饰磁珠|amine magnetic bead 核酸提取磁珠 核酸DNA/RNA提取纯化磁珠 氨基修饰 核酸DNA/RNA纯化提取磁珠 羧基修饰 DNA提取硅羟基磁珠|RNA提取磁珠|核酸提取磁珠 GMA磁珠 亲和素磁珠|亲和素标记磁珠|avidin magnetic bead 巯基磁珠PuriMag G-SH NHS磁珠|高载量PuriMag G-NHS磁珠 叠氮磁珠|Azide 磁珠|炔烃标记蛋白点击偶联|PuriMag G-Azide Beads|Azide magnetic bead 蛋白L磁珠|Protein L磁珠|Protein L magnetic bead|抗体纯化|沉淀 蛋白A/G磁珠|Protein A/G磁珠|Protein A/G magnetic bead 蛋白G磁珠|ProteinG磁珠|Protein G magnetic bead 蛋白A磁珠|Protein A磁珠|Protein A magnetic bead|沉淀|抗体纯化 磁珠|修饰磁珠|biotin磁珠|biotin magnetic bead|PuriMag? G-Biotin 甲苯磺酰基活化磁珠|PuriMag G-Ts聚合物磁珠 氨基磁珠|高密度氨基磁珠|聚合物磁性微球|PuriMag G-NH2|amine magnetic bead 羧基磁珠|羧基修饰磁珠|高密度羧基磁珠|聚合物羧基磁珠PuriMag G-COOH|carboxyl magnetic bead 羟基磁珠聚合物包覆磁珠PuriMag GS-OH(短臂) 环氧基磁珠|聚合物包覆磁珠PuriMag G-Epoxy|高环氧基密度磁珠| 链霉亲和素磁珠|SA磁珠|亲和素磁珠|PuriMag G-streptavidin 高biotin结合容量 聚苯乙烯(PS)包覆磁珠—阳离子交换 聚苯乙烯(PS)包覆磁珠—阴离子交换 聚苯乙烯(PS)包覆磁珠—表面氯甲基 聚苯乙烯(PS)包覆磁珠—表面环氧基|环氧基磁珠|高密度环氧基磁珠 聚苯乙烯(PS)包覆磁珠 聚苯乙烯(PS)包覆磁珠—表面羧基|羧基磁珠|高密度羧基 聚苯乙烯磁性微球 羧基磁珠|化学发光磁珠|发光磁珠 链霉亲和素磁珠|1微米 SA 磁珠|发光磁珠|链霉亲和素标记磁珠 均一单分散磁珠表面二氧化硅包覆PuriMag-Homo-SiO2 均一单分散磁珠表面聚合包覆PuriMag-Homo-polymer 琼脂糖磁性微球 偶联用琼脂糖磁珠 羧基活化琼脂糖磁珠|羧基琼脂糖微球|Magarose-COOH 氨基活化琼脂糖磁珠|氨基琼脂糖微球|Magarose-NH2 NHS活化琼脂糖磁珠|NHS琼脂糖微球|Magarose-NHS 环氧基活化琼脂糖磁珠|环氧基琼脂糖微球|Magarose-Epoxy CNBr活化琼脂糖磁珠|CNBr琼脂糖微球|Magarose-CNBr 醛基活化琼脂糖磁珠|醛基琼脂糖微球|Magarose-CHO 琼脂糖磁性微球|琼脂糖磁珠|Magnetic agarose bead 蛋白纯化琼脂糖磁珠 Protein A/G包被琼脂糖磁珠|Protein A/G包被琼脂糖微球|Magarose-ProA/G Strep-tag II蛋白纯化磁珠|Strep-Tactin琼脂糖磁性微球 DEAE弱阴离子交换琼脂糖磁珠 肝素包被琼脂糖磁珠|Heparin包被琼脂糖微球 GST融合蛋白纯化用琼脂糖磁珠 His-tag标签蛋白纯化磁珠Magarose TED 组氨酸标签蛋白纯化磁珠|Magarose NTA His标签蛋白纯化磁珠|Magarose IDA 其他 羧基磁珠|羧基磁性微球|羧基磁性纳米粒子 Fe3O4磁核|顺磁性纳米氧化铁|铁氧体磁珠|200-400nm磁性纳米粒子 PCR产物纯化磁珠|Agencourt AMPure XP等效磁珠 磁珠 链霉亲和素磁珠 链霉亲和素-(SA-Biotin) Streptavidin/SA/链霉亲和素 蛋白偶联链霉亲和素共价连接于固相载体表面 结合化抗 体、核酸、蛋白等配体分子 沉淀磁珠Protein A/G Mag NH修饰生物配体偶联磁珠 Magrose NHS修饰生物配体偶联磁珠 基础磁珠 羟基磁珠Mag OH/核酸提取和纯化设计 羧基磁珠Mag COOH 顺磁性、磁响应性、丰富羧基官能团、单分散性和亚微米尺度粒径 蛋白分离纯化羧基磁珠 羧基磁珠高载量蛋白/多肽/寡聚核苷酸/科研分子 氨基磁珠Mag NH2 单分散性氨基磁珠 寡聚核苷/蛋白/多肽-戊二醛-共价偶联微球表面 葡聚糖纳米磁珠Dextran 顺磁性氧化铁颗粒粒径为13-15 nm之间 蛋白纯化磁珠 His-tag蛋白纯化磁珠 IDA-Nickel IDA-Cobalt IDA-Nickel Kit IDA-Cobalt Kit GST融合蛋白纯化磁珠 融合蛋白纯化磁珠GSH 融合蛋白纯化磁珠GSH kit Strep-tag II蛋白纯化磁珠 功能化材料Strep-tag II 功能化材料蛋白纯化磁珠 Magrose Strep-Tactin Magrose Strep-Tactin kit rp-Ser-His-Pro-Gln-Phe-Glu-Lys 肝素磁珠 Magrose Heparin 的磁响应性的肝素磁珠 磁珠表面偶联肝素带有负电性硫酸根离子基团 DEAE磁珠 Magrose DEAE弱阴离子交换磁珠 的磁响应性DEAE磁珠 离子交换能力的DEAE磁珠 的蛋白结合能力的DEAE磁珠 离子交换配基为二乙氨乙基的DEAE磁珠 抗体纯化磁珠 Protein A/G抗体纯化磁珠 Protein A Antibody Purification Kit Protein A/G Antibody Purification Kit Magrose ProteinA Antibody Purification 核酸提取磁珠 DNA/RNA提取试剂盒Viral DNA/RNA Kit 游离DNA提取试剂盒Circulating DNA Ki 唾液基因组DNA提取试剂盒Saliva DNA Kit 粪便总DNA提取试剂盒Stool DNA Kit 血液基因组DNA提取磁珠试剂盒Blood DNA Extraction Kit DNA-片段筛选试剂盒(磁珠法)DNA Select Isolation PCR产物纯化试剂(磁珠法)PCR Purification 凝胶回收试剂盒 质粒 DNA 小量抽提试剂盒 上述产品齐岳生物均可供应,用于科研! wyf 02.01 ? 相关目录: 巨噬细胞外囊泡(EVs)包裹白介素10(I 层析介质-离子交换树脂使用注意事项

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