Y2HGold Yeast Strain 酵母双杂交用甘油菌的实验手册

文章来源 : 齐岳生物

作者:zhn

发布时间 : 2022-08-23 12:41:44

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产品名称:Y2HGold Yeast Strain 酵母双杂交用甘油菌的实验手册

产品描述:

名称:Y2HGold Yeast Strain 酵母双杂交用甘油菌其他名称:Y2HGold酵母双杂交用甘油菌规格:300μl运输温度:干冰运输保存温度:-20℃保存期:1年应用:酵母双杂交用菌株产品描述:酵母双杂交系统是用于体内研究蛋白相互作用的一种便利的工具,常用的如GAL4为基础的双杂交系统,使用酵母转录因子GAL4来检测转录后的蛋白相互作用。工作原理为:一个酵母转录因子GAL4由两个可以分开,功能上相互的结构域组成,N端有一个147个氨基酸组成的DNA结合域(DNA- BD),C端有一个由113个氨基酸组成的转录域(AD)。DB可以识别并结合上游序列(UAS),而AD能UAS下游基因进行转录,单独的BD或AD不能基因转录。正常情况,BD和AD不会结合,将待检测的分别与BD和AD融合,形成诱饵融合蛋白(bait-DNA)和诱捕融合蛋白(prey-DNA),只有当诱饵和诱捕蛋白发生相互作用,促使BD和AD的相互接近,形成GAL4,从而报告基因的转录。Y2HGold是GAL4系统酵母双杂交用实验菌株,能直接转化质粒或与MATα型酵母菌株Y187通过接合(mating)操作进行蛋白相互作用验证或双杂交文库筛选和构建。Y2HGold-GAL4酵母双杂交系统需要两种质粒配套使用,分别为pGBKT7和pGADT7。前者筛选标志为Trp,用于表达DNA-BD与诱饵蛋白(bait)的融合蛋白;后者筛选标志为Leu,用于表达AD与诱捕蛋白(prey)的融合蛋白。Y2HGold有四个报告基因:AUR1-C,HIS3, ADE2, MEL1,分别由三个完全异源的Gal4反应启动元件-G1,G2,M1调控,这三种启动子只有GAL4识别的17bp区相同,其余部分同。这一特征缩减假阳性发生的概率。因为,诱捕蛋白单独结合引起假阳性都需要识别3个不同序列,4个报告基因表达。另外,新报告基因AUR1-C与以往的营养缺陷报告基因相比,其筛选-金担子素(Aureobasidin A,AbA)可以杀死非抗性克隆,大大降低背景克隆的生长。具有更低背景,这一特点也可降低酵母双杂交假阳性发生的概率。基本信息:培养基:YPDA培养条件:28℃,YPDA,有氧培养保存方式:30%甘油,-20℃保存转化方式:PEG/LiAC;电激;基本应用:酵母双杂交实验保存与运输方法保存:-20℃保存,一年。运输:干冰运输。使用说明:齐岳生物提供的各批次质粒菌株发货前均经过严格的多重验证,如存在质量问题,请在收到产品三个月内通知我司。收到甘油菌后,请及时在固体平板上划线培养,挑取单菌落接种到液体培养基中,震荡培养后使用并保存新的甘油菌。注意事项1.使用甘油菌时可不完全融解,在甘油菌表面蘸取少量涂布固体琼脂平板即可;也可完全融解后使用,但随着冻融次数的增加,菌株的活力会逐渐下降。2. 为了您的和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。供应产品目录:?SD/-Ade with AgarSD/-Ade/-His with AgarSD/-Ade/-His/-Leu/-Met/-Trp with AgarSD/-Ade/-His/-Leu/-Met-Trp/-Ura with AgarSD/-Ade/-His/-Leu/-Trp with AgarSD/-Ade/-His/-Leu/-Trp/-Ura with AgarSD/-Ade/-His/-Met with AgarSD/-Ade/-His/-Trp with AgarSD/-Ade/-Leu with AgarSD/-Ade/-Leu/-His with AgarSD/-Ade/-Leu/-Trp with AgarSD/-Ade/-Trp with AgarSD/-Arg/-His/-Leu/-Lys/-Ura with AgarSD/-Cys/-Met/-Ura with AgarSD/-Glu/-Ura with AgarSD/-His with AgarSD/-His/-Leu with AgarSD/-His/-Leu/-Met/-Trp with AgarSD/-His/-Leu/-Met/-Ura with AgarSD/-His/-Leu/-Trp with AgarSD/-His/-Leu/-Trp/-Ura with AgarSD/-His/-Leu/-Ura with AgarSD/-His/-Trp with AgarSD/-His/-Trp/-Ura with AgarSD/-His/-Ura with AgarSD/-Leu with AgarSD/-Leu/-Ile/-Val with AgarSD/-Leu/-Met/-Trp with AgarSD/-Leu/-Met/-Trp/-Ura with AgarSD/-Leu/-Trp with AgarSD/-Leu/-Trp/-Ura with AgarSD/-Leu/-Ura with AgarSD/-Met with AgarSD/-Met/-Trp with AgarSD/-Trp with AgarSD/-Trp/-Ura with AgarSD/-Ura with Agaryyp2021.2.3 相关目录: 明胶甲基丙烯酰基(GelMA)生物墨水自 DO Supplement -Trp配制、种类及用途

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