CY5‑Thapsigargin CY5‑毒胡萝卜素 荧光标记毒胡萝卜素

产品名称：CY5‑Thapsigargin CY5‑毒胡萝卜素 荧光标记毒胡萝卜素

产品描述：

CY5‑Thapsigargin CY5‑毒胡萝卜素 荧光标记毒胡萝卜素

一、产品概述

CY5‑Thapsigargin 是一种将远红荧光染料 Cyanine5（CY5） 分子通过稳定的共价偶联方式标记到 Thapsigargin（毒胡萝卜素） 上的荧光探针。Thapsigargin 是一种来源于地中海植物 Thapsia garganica 的天然倍半萜内酯类小分子，作为 钙泵（SERCA）抑制剂 在细胞信号转导、细胞应激反应与细胞死亡机制研究中具有重要作用。

通过将 CY5 远红荧光团连接到 Thapsigargin 分子上，CY5‑Thapsigargin 不仅保留了原始化合物对 内质网钙泵 SERCA（Sarco/Endoplasmic Reticulum Ca²⁺‑ATPase） 的高亲和力，还具备可在细胞和组织样本中可视化定位、动态追踪和定量分析的强大光学特性，使其成为研究细胞钙稳态、内质网应激和药物作用机制的重要工具。

二、化学结构与共价偶联机制

1. Thapsigargin 的结构特性

Thapsigargin 是一种结构复杂的倍半萜内酯天然产物，主要包含多个环结构与酯基团，其对 SERCA 的高亲和力使得它可有效阻断 ER 钙泵功能，导致细胞内钙离子水平升高。这一独特的分子结构为标记提供了偶联位点，同时对功能区域影响较小，因此适合用于设计衍生荧光探针。

2. CY5 荧光团介绍

CY5 是一种拥有远红至近红外光谱发射的大分子荧光染料：

激发波长：约 650 nm

发射波长：约 670 nm

优点：

低细胞自发荧光背景；

深组织成像穿透；

与常见荧光通道（如 FITC、DAPI 等）兼容适合多通道成像。

3. 共价偶联策略

CY5‑Thapsigargin 的制备通常采用成熟的化学偶联方法：

活化反应：Thapsigargin 分子上的羟基或酯基可以通过适当化学修饰引入亲核或电性活化官能团；

偶联方式：通过 CY5 的活性衍生物（如 CY5‑NHS 酯、CY5‑maleimide 等）与 Thapsigargin 分子上的可反应基团形成 稳定的共价键（如酰胺键）；

稳定连接：共价偶联确保在细胞内复杂环境下荧光团稳定附着，降低信号丢失或非特异性游离染料干扰。

三、光学特性与性能优势

CY5‑Thapsigargin 探针具有显著的光学性能：

1. 远红光谱发射

激发波长：约 650 nm

发射波长：约 670 nm

这种远红光谱显著低于细胞自身自发荧光的背景区域，使得在复杂生物体系中成像信号更清晰、对比度更高。

2. 高信噪比与光稳定性

CY5 荧光团提供强烈信号；

远红通道有效减少背景干扰；

优秀的光稳定性适合长时间共聚焦或活体成像实验。

四、生物学功能与应用领域

1. SERCA 抑制机制研究

Thapsigargin 是一种经典的 SERCA 抑制剂，通过阻断内质网钙泵使细胞内钙离子水平失衡，从而诱导内质网应激和下游细胞应答通路。CY5‑Thapsigargin 探针可用于：

实时可视化 SERCA 结合位点；

追踪 Thapsigargin 在细胞内的分布和摄取路径；

定量分析抑制过程中的空间–时间变化。

2. 内质网应激与钙信号通路成像

钙稳态的破坏是诱导多种细胞应激、细胞死亡或自噬过程的重要因素。通过 CY5‑Thapsigargin：

可观察 ER 内钙储量变化；

可结合钙敏感荧光探针监测钙信号；

可研究内质网应激诱导的细胞病理过程。

3. 药物筛选与作用机制分析

在药物开发中，CY5‑Thapsigargin 可作为工具分子：

评估候选小分子对 SERCA 抑制效应的干预；

阐明钙通路干扰对细胞功能的影响；

与高通量筛选结合进行药效评估或毒性分析。

4. 多通道联合成像研究

CY5‑Thapsigargin 远红谱的光学信号可与其他荧光探针结合：

DAPI（细胞核）；

FITC/TRITC（内质网、线粒体探针）；

钙指示剂（如 Fluo‑4）；

多通道成像可同时观察多个细胞结构或信号通路，提高实验信息量。

五、产品规格与质量保证

规格型号 产品编号 纯度 储存条件

1 mg CY5‑TG‑01 ≥95 %（HPLC） –20 ℃ 避光保存

5 mg CY5‑TG‑05 ≥95 %（HPLC） –20 ℃ 避光保存

定制规格 CY5‑TG‑CUST ≥98 % 可商议

质量控制流程：

HPLC 纯度检测：确保产品主峰 ≥95 %；

MS/HRMS 结构确认：验证分子量及共价连接情况；

UV‑Vis/荧光光谱分析：确认 CY5 发射特性与光学性能；

功能试验验证：检测与 SERCA 结合能力与细胞成像效果。

六、实验使用指南

为获得稳定可靠的数据表现，推荐如下实验操作：

1. 储备液配制

将固体产品溶于适宜溶剂（如 DMSO）配制成高浓度储备液（例如 1–5 mM）；

避免长时间光照；

分装保存，避免重复冻融。

2. 细胞处理与成像

在细胞培养体系中将探针终浓度调整至合适范围（如 100–500 nM），根据细胞类型与实验需求优化；

孵育时间可从几分钟到数小时；

使用共聚焦显微镜或多光子显微镜在远红通道采集图像；

可结合钙敏感探针（如 Fluo‑4）进行共定位分析。

七、优势与特色总结

1. 直观定位与动态追踪

CY5‑Thapsigargin 能够在细胞或组织样本中清晰显示其分布位置，为研究 SERCA 结合位点、内质网钙稳态变化以及药物反应机制提供直观图像。

2. 多功能实验适配性

远红荧光信号、稳定共价结构、高细胞兼容性等特性使其适配多种成像平台和实验体系。

3. 与其他标记兼容

可与常用荧光探针、钙指示剂、细胞器探针联合使用，多通道成像将实验信息维度大幅提升。

八、注意事项与建议

为确保实验数据质量，应注意以下事项：

光漂白防护：尽量避免探针暴露于高强度光线下，以延长荧光信号稳定性；

对照设置：设置无探针对照以及自由 CY5 染料对照以排除非特异性信号；

浓度优化：不同细胞类型对 Thapsigargin 的敏感性不同，建议先行优化使用浓度；

储存条件：避免潮解、高温与光照，建议 –20 ℃ 干燥避光保存。

九、总结

CY5‑Thapsigargin（CY5‑毒胡萝卜素） 是一种集高性能光学信号与生物功能活性于一体的荧光探针。它通过将远红荧光分子 CY5 共价偶联到 SERCA 抑制剂 Thapsigargin 上，使研究人员可以在显微成像和药物机制分析中直观、动态地观察钙稳态调控、内质网应激反应、钙通路干扰等生物过程，是细胞生物学、信号通路研究和药物开发领域的理想工具。

西安齐岳生物科技有限公司提供专业的荧光标记服务与定制解决方案，致力于满足科研与应用领域对高性能荧光标记产品的需求。公司可针对蛋白质、肽、多糖、小分子化合物以及纳米材料进行高效、稳定的荧光修饰，涵盖从可见光到近红外 NIR）范围的多种荧光染料，如FITC、Cy3、Cy5、Cy5.5及Cy7等。

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